細胞培養(yǎng)中的一些經(jīng)驗技巧,以及如何選購細胞培養(yǎng)耗材
發(fā)布日期:2015-06-07 00:00 作者: 來源:http://m.79qx.cn 點擊:
根據(jù)細胞培養(yǎng)器皿根據(jù)制作材料的不同,也有玻璃和塑料之分。不同的細胞對胰酶的敏感度不一樣,所以在實驗中我們常常會遇到一些細胞消化半天也沒有起色,導致細胞狀態(tài)不斷下滑,直至最后的死亡以至于實驗進展的不順利。當然,有時候是可以通過加一些EDTA等來增強胰酶的能力,或者提高胰酶的濃度來實現(xiàn),在培養(yǎng)一些細胞過程中,我發(fā)現(xiàn),一些細胞對玻璃和塑料制品粘附能力不同,如RAW264.7,平滑肌細胞等,在轉(zhuǎn)換培養(yǎng)瓶之后,可以發(fā)現(xiàn)好消化了很多,并且在回到原制品的培養(yǎng)瓶時不會改變它的貼壁能力。這里希望有經(jīng)驗的戰(zhàn)友可以分享你們的經(jīng)驗。
細胞培養(yǎng)器材的選擇:從大小來講,細胞培養(yǎng)瓶約可分為約600ml,250ml,50ml和25ml的,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細胞貼壁和生長。600ml 、300ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用(如單克隆細胞的培養(yǎng)等),50ml的多用于一般性細胞實驗用(一般性的傳代,保存細胞,為實驗提供細胞等),25ml一般是用來復蘇細胞或細胞較少時的培養(yǎng),還有做原代細胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。當然還有其他如圓形的等,都可根據(jù)個人愛好和實驗需要自己選擇。
關(guān)于培養(yǎng)板的購買其實也沒有什么經(jīng)驗,想說的就是要盡量避免購買國產(chǎn)的培養(yǎng)板,國產(chǎn)的一些培養(yǎng)瓶還可以,但是培養(yǎng)板我們買過很多國產(chǎn)的,確實效果不是很好,細胞在里面基本上長的非常非??拇~。所以經(jīng)費富余的情況下,這些東西能買進口的就買吧。大公司的基本都可以買,BD,Corning等等。這些東西原則上是一次性的,但是我們大部分實驗室根本不可能做到,其實泡酸,洗干凈再用也沒問題,畢竟我們沒有老外那么富足的經(jīng)費,所以我們就累點吧,多做點體力活鍛煉一下身體。
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